基于生物信息学验证海桐皮-透骨草抑制炎性软骨细胞铁死亡的作用机制
Bioinformatics-based verification of the mechanism of Haitongpi-Tougucao in inhibiting ferroptosis in inflammatory chondrocytes
摘要基于生物信息学验证海桐皮-透骨草(复方海桐皮)抑制脂多糖(LPS)诱导的大鼠炎性软骨细胞铁死亡的作用机制.通过生物信息学工具预测骨关节炎铁死亡的相关作用机制,确定待验证通路.利用相关试剂盒检测亚铁离子浓度、还原型谷胱甘肽(GSH)质量分数;利用酶联免疫法(ELISA)检测加药后细胞活力和相关细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的质量浓度;蛋白免疫印迹法(Western-Blot)检测各组NLRP3 炎症小体通路相关的蛋白NLRP3、Caspase-1、ASC以及抑制铁死亡的基因GPX4 蛋白表达水平.结果发现亚铁离子浓度显著降低,GSH质量分数显著升高;ELISA实验结果显示,药物各组与模型组相比 IL-1β、IL-6、TNF-α 炎症因子质量浓度均降低;WB 结果显示,药物各剂量组与模型组相比,NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白表达水平显著降低,GPX4 蛋白表达水平显著升高.复方海桐皮可以通过介导NLRP3 炎症小体通路对炎性软骨细胞的铁死亡进行干预,从而达到治疗骨关节炎的目的.
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