换一批表达藤黄微球菌过氧化氢酶基因的工程大肠杆菌发酵条件优化
Production of Micrococcus luteus Catalase under Optimized Fermentation Conditions of Engineered E. coli Strain
摘要目的优化表达重组藤黄微球菌(M.luteus)过氧化氢酶基因工程菌的发酵条件.方法以生物量和目标蛋白表达量为判断标准,利用单因子试验和正交试验在摇瓶水平优化初始pH、IPTG浓度、诱导时机、诱导时间等影响工程菌发酵制备藤黄微球菌过氧化氢酶的发酵条件.结果最佳发酵工艺参数:培养基初始pH 6.5,摇床转速180 r/min,装液量75 mL,接种量6%,培养温度37℃,诱导表达时间5 h.蛋白表达量比优化前提高近30%,重组蛋白经Ni-NTA纯化和透析后,酶活性为166.0 U/(mg·protein),以实验条件相同野生菌酶活100.0 U/(mg·protein)为对照,重组酶的酶活性提高66%.结论工艺优化后,酶表达量及酶活性均显著提高.
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关键词
过氧化氢酶融合表达Ni-NTA亲合层析发酵工艺catalasefusion expressionNi-NTA affinity chromatographyfermentation condition
DOI
10.3969/j.issn.1672-979X.2012.05.001
发布时间
2013-05-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
上海市科委纳米技术专项（1052nm05702）
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