换一批Zn2+对PPR蛋白锌指结构域原核表达的影响
Effect of Zn2+ on Prokaryotic Expression of Zinc Finger Domain of PPR Protein
摘要目的 研究Zn2+对PPR蛋白锌指结构域的原核表达、纯化过程的影响,并对Zn2+的作用机制进行了初步探索.方法 采用分子克隆的方法构建PPR蛋白锌指结构域及其突变体的His-SUMO融合蛋白表达质粒,研究Zn2+对其原核表达及Ni-柱亲和纯化过程的影响,并利用快速诱导法对Zn2+的作用机制进行了初步探索.结果培养基中添加1 mmol/L Zn2+可明显提高融合蛋白的稳定性;亲和纯化时在上清中添加10 mmol/L EDTA可明显提高亲和纯化效率;Zn2+作用机制的初探实验表明只有Zn2+可作用于锌指结构位点,并帮助稳定锌指结构域.结论 Zn2+可作用于PPR蛋白的锌指结构位点,并使锌指结构变得稳定;在蛋白原核表达时添加一定浓度的Zn2+可明显提高蛋白稳定性.
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分类号
Q816（蛋白质工程）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1672-979X.2019.02.005
发布时间
2019-04-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家级大学生创新创业计划项目（(105-03-0178028)）
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