UPLC-MS/MS检测长白山白眉蝮蛇蛇毒中的类凝血酶

Determination of Thrombin-like Enzyme from Venom of Agkistrodon Halys Pallas by UPLC-MS/MS

二维码有效期 120s

摘要目的基于具有种属特异性的长白山白眉蝮蛇类凝血酶特征肽,建立超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)检测蛇毒种属来源及类凝血酶含量的方法.方法样品经还原、烷基化、胰蛋白酶消化后,利用UPLC-MS/MS对类凝血酶特征肽进行检测.色谱柱:Waters ACQUITY UPLC BEH C18(50 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相:0.1％甲酸溶液-0.1％甲酸乙腈,梯度洗脱;流速:0.2 ml/min;以m/z 877.4(双电荷)→892.4,550.2作为检测离子,采用ESI+模式进行多反应监测(MRM).结果特征肽在20～400 ng/ml范围内浓度与色谱峰面积呈良好的线性关系(r=0.9990),3个水平的加标回收率为91.2％～107.8％,精密度和重复性均良好.结论本方法准确、可靠,可用于长白山白眉蝮蛇蛇毒中类凝血酶的定性定量分析,为蛇毒血凝酶类药物的质量控制提供技术支持.

作者咸瑞卿 ^[1] 王聪聪 ^[2] 巩丽萍 ^[2] 张迅杰 ^[2] 彭丽 ^[3] 石峰 ^[2] 学术成果认领

作者单位山东省食品药品检验研究院,国家药品监督管理局仿制药研究与评价重点实验室,山东省仿制药一致性评价工程技术研究中心,山东济南 250101;山东大学药学院,山东济南 250012 ^[1] 山东省食品药品检验研究院,国家药品监督管理局仿制药研究与评价重点实验室,山东省仿制药一致性评价工程技术研究中心,山东济南 250101 ^[2] 华润双鹤利民药业(济南)有限公司质量部,山东济南 250200 ^[3]

关键词长白山白眉蝮蛇特征肽类凝血酶超高效液相色谱-串联质谱

分类号 R927.2

栏目名称论著

DOI 10.3969/j.issn.1672-979X.2022.04.008

发布时间 2022-08-16

基金项目

国家药典委员会药品标准制修订研究课题