换一批
换一批人酪氨酸羟化酶全长及催化核心序列的克隆与表达
Clonging and Expression for DNA Fragment of Complete Sequence and Catalytic Domain of Human Tyrosine Hydroxylase
摘要设计合成含适当酶切位点的PCR引物,以人的全长THcDNA为模板,进行PCR扩增反应,得到人酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)全长及催化核心序列,将其分别插入谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合表达载体pGEX-4T-1,转化入大肠杆菌BL21,以IPTG诱导表达,SDS-PAGE、western blotting分析表达产物.结果获得了编码N-端缺失145个氨基酸的酪氨酸羟化酶催化结构域的cDNA片段及带一定内切酶识别位点的全长片段,表达载体构建正确.插入片段序列与人THmRNA相应序列完全一致.转入重组质粒的菌经诱导后,有相对分子质量约为8.3万及6.6万的外源融合蛋白表达,并得到较纯的酶蛋白.
更多相关知识
主题词
酪氨酸单氧化酶(Tyrosine 3-Monooxygenase)人(Persons)蛋白(Egg White)谷胱甘肽(Glutathione)肿瘤转移(Neoplasm Metastasis)
分类号
Q546
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1006-7795.2000.04.001
发布时间
2004-01-08
- 浏览76
- 被引2
- 下载4
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
