换一批
换一批乙肝病毒感染肝星状细胞的体外研究
In vitro Study on the Infectivity of Hepatitis B Virus on Human Hepatic Stellate Cells
摘要目的 初步研究乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)能否体外感染人肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC),以期为阐明慢性乙肝的致病机制提供新的实验依据.方法 体外培养人肝星状细胞株(LX-2),用不同浓度HBV感染者的血清进行感染,HBVDNA终浓度分别为104、105、106、107拷贝/mL,在感染24、48和72 h收取细胞.荧光定量多聚酶链反应(polymerase chain reaction,FQ-PCR)方法 测定细胞内的总HBVDNA和共价闭合环状DNA(cccDNA);Southern blotting及Northern blotting方法 测定细胞内是否存在HBV复制中间体及mRNA.结果 在HepG2.2.15细胞中,分别检测到2.58拷贝/细胞和0.86拷贝/细胞的HBVDNA和cccDNA.在少量LX-2细胞中,可以检测到HBVNA,均在0.05拷贝/细胞以下,在所有LX-2细胞中未检测到cccDNA;用Southern blotting和Northern blotting方法 未检测到LX-2细胞中存在HBV复制中间体及mRNA;而在HepG2.2.15细胞中检测到阳性条带.结论 在体外实验中,未发现HBV感染肝星状细胞的证据.
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