换一批Hela细胞蛋白质分离和肽质量指纹谱鉴定方法的建立
Identification of Proteins from Hela Cells by Two-Dimensional Electrophoresis and Peptide Mass Fingerprinting
摘要目的 研究Hela细胞总蛋白质的分离及利用肽质量指纹谱对蛋白质进行鉴定的方法 .方法 提取了Hela细胞的总蛋白质,通过双向电泳技术对蛋白质进行了分离,并应用图像扫描仪及图像分析软件获取蛋白质点的数字化信息.对其中不同丰度的蛋白质点,进行胶内酶切后,通过基质辅助激光解吸/电离直角型飞行时间质谱(MALDI O-TOF-MS)分析,再将检测出的多肽质量数通过Mascot搜索引擎检索NCBInr数据库.结果 获得了Hela细胞总蛋白质双向电泳图谱及蛋白质点的数字化信息,通过MALDI O-TOF-MS检测得到的肽质量指纹谱再经过网上公共数据的检索从而获得3个蛋白质点分别是α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)、γ-肌动蛋白(γ-actin)和过氧化物酶2(peroxiredoxin 2).结论 Hela细胞总蛋白质双向电泳的分离效果较好,肽质量指纹谱法能有效地对Hela细胞的蛋白质斑点进行鉴定.
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分类号
Q503（生物化学一般性问题）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1006-7795.2009.03.016
发布时间
2009-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30572183,30772573）
高等学校博士学科点专项科研基金（20060025011）
北京市教委科技发展计划重点项目（06-0184;KZ200610025013）
首都医科大学基础临床科研合作项目（2007JL13）
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