血管损伤反应对血管平滑肌合酶Ⅰ和转录释放因子表达的影响及机制

Effect of vascular injury on the expression of polymerase Ⅰ and transcript release factor in vascular smooth muscle and its mechanism

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摘要目的探讨聚合酶Ⅰ和转录释放因子(polymerase Ⅰ and transcript release factor,PTRF or Cavin-1)在损伤血管后血管再狭窄病理过程的作用及分子机制.方法将200~220 g雄性Sprague Dawley大鼠采用数字表法随机分为假手术组和血管损伤组,血管损伤组制备颈动脉损伤动物模型.用苏木精伊红染色显示损伤后颈动脉的结构,免疫荧光、Western blotting检测损伤后血管的Cavin-1蛋白表达,real-time RT-PCR方法检测损伤后血管的Cavin-1 mRNA表达,免疫组织化学、Western blotting、免疫共沉淀法检测颈动脉泛素化蛋白的表达.大鼠动脉平滑肌细胞实验分为①空白对照组(control,CTRL);②CHX组:用放线菌酮(cycloheximide, CHX,25 μmol/L)预处理1 h;③CHX+MG组:用CHX预处理1 h后,接着用MG 132(蛋白酶体抑制剂,10 μmol/L)处理24 h;④CHX+CQ组:用CHX预处理1 h后,接着用氯喹(chloroquin,CQ,10 μmol/L)处理24 h.应用Western blotting检测细胞Cavin-1蛋白浓度.结果动物模型中,球囊损伤后,血管壁明显增厚,Cavin-1表达显著下降(P<0.05),Cavin-1 mRNA表达差异不明显,泛素化蛋白表达显著上调(P<0.05).细胞实验中,应用CHX预处理可明显降低平滑肌细胞Cavin-1的表达(P<0.05),而CHX+MG可以明显对抗CHX上述作用过程(P<0.05).结论球囊损伤颈动脉后,血管的Cavin-1蛋白表达下调,其机制可能与增加的泛素化-蛋白酶体降解途径有关.

作者陈雪莹 ^[1] 姚烨 ^[1] 周高适 ^[1] 陶诗婉 ^[1] 陈兆煜 ^[2] 谈智 ^[3] 学术成果认领

作者单位中山大学中山医学院临床医学系,广州,510080 ^[1] 中山大学附属第三医院神经内科,广州,510630 ^[2] 中山大学中山医学院高血压研究所,广州 510080;中山大学中山医学院生理教研室,广州 510080 ^[3]

关键词血管损伤平滑肌细胞泛素化血管再狭窄 vascular injury smooth muscle cell ubiquitination vascular restenosis

主题词血管(Blood Vessels)肌细胞, 平滑肌(Myocytes, Smooth Muscle)创伤和损伤(Wounds and Injuries)缩窄, 病理性(Constriction, Pathologic)泛素化(Ubiquitination)

分类号 R54

栏目名称 基础研究

DOI 10.3969/j.issn.1006-7795.2017.04.012

发布时间 2017-07-31

基金项目

国家自然科学基金 广东省科技厅社会发展领域项目 广东省自然科学基金项目(2014A030313062).This study was supported by National Natural Science Foundation of China Science and Technology Department of Guangdong Natural Science Foundation of Guangdong