摘要目的 探究 Rac-GTP 酶活性蛋白 1(Rac GTPase-activating protein 1,RACGAP1)在细胞周期蛋白依赖性激酶 4/6(cyclin-dependent kinases 4/6,CDK4/6)抑制剂耐药中的作用和分子机制,以揭示靶向 RACGAP1 是否可协同增强 CDK4/6 抑制剂疗效,逆转耐药表型,为克服乳腺癌等癌症的耐药寻找新的靶点策略.方法 利用人乳腺癌细胞株 MCF-7 构建 CDK4/6 抑制剂瑞博西利(Ribociclib)耐药细胞系.收集耐药细胞系中的细胞沉淀,进行转录组测序,对比分析 ribociclib 耐药细胞系中基因的表达差异.随后,筛选出 ribociclib 耐药细胞系中表达上调明显的基因.最后,通过癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas Program,TCGA)数据库获取乳腺癌患者信息,利用 R 语言将表达上调的基因进行基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA),探索其显著相关的下游通路及表型.结果 在乳腺癌细胞系及患者临床样本中,RACGAP1 的转录及蛋白表达水平均显著升高,且其高表达状态与 ribociclib 治疗耐药呈正相关;基因沉默抑制 RACGAP1 后,耐药细胞对 CDK4/6 抑制剂的敏感性显著恢复.结论 分析细胞系和临床样本中 RACGAP1 的高表达与 CDK4/6 抑制剂治疗耐药性相关.进一步分析表明,RACGAP1通过调节细胞周期和微管动力学影响肿瘤细胞对 CDK4/6 抑制剂的敏感性.抑制 RACGAP1 表达可以显著恢复细胞对 CDK4/6抑制剂的敏感性,提示其作为克服耐药性的新靶点具有潜在的临床应用价值.