产β-葡萄糖苷酶微生物的筛选鉴定及其在人参皂苷Compound K转化中的应用
Screening and Identification of Microorganisms Producing β-glucosidase and Their Application in Transformation of Ginsenoside Compound-K
摘要本试验用七叶苷培养基从西洋参(Panax quinquefolius)的根际土壤中筛选产β-葡萄糖苷酶的菌种,并通过转化试验发现一株可以高效转化人参皂苷Rb1为人参皂苷Compound K(C-K)的菌株.基于16 S rDNA基因序列的系统进化树分析确定该菌株为耐热科恩氏菌(Cohnella thermotolerans).根据单因素试验结果,选取菌液浓度、反应pH值、反应时间3个因素,以C-K的含量为响应值,采用Box-Behnken中心组合试验设计3因素3水平的响应面试验,建立回归模型.确定优化的皂苷转化条件为反应pH 6.4、菌液浓度9.0×108 cfu/mL、反应时间7.5 d,在该条件下人参皂苷转化率为78.36%.通过高效液相色谱分析该菌株转化人参皂苷Rb1的途径为Rb1→Rd→F2→C-K.本研究为稀有皂苷C-K的微生物转化提供了新的菌种来源,也为C-K的工业化生产提供了理论依据.
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