摘要目的:为获得高表达有活性的p16蛋白,构建含p16 cDNA的重组转移载体.方法:EcoRI-xhoI双酶切克隆质粒pBLUESCRIPT-p16,低融点琼脂糖回收0.8kb的p16 cDNA片段,插入质粒pSXIVVI+X3,构建含p16的重组载体pX3-p16,并对重组子以菌落原位杂交和酶切电泳两种方法进行鉴定.结果:电泳证实低融点琼脂糖回收的片段为0.8kb.菌落原位杂交筛选8个阳性克隆,酶切电泳证实阳性克隆中p16 cDNA插入方向正确.结论:成功构建了含p16 cDNA的重组转移载体,为p16在昆虫细胞和活体昆虫中的表达奠定了基础.
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