换一批人4-1BB-hIgG1Fc融合蛋白真核表达载体的构建
Construction of human 4-1BB-hIgG1 fusion protein eukaryotic expressing vector
摘要目的:构建人4-1BB胞膜外区-hIgG1Fc融合蛋白真核表达载体.方法:PCR扩增人4-1BB胞膜外区和hIgG1Fc基因片段,用HindⅢ、Pst I酶切4-1BB胞膜外区,PstI、EcoR I酶切hIgG1Fc,HindⅢ、EcoRI酶切pCDNA3,纯化后的酶切产物经T4DNA连接酶连接,转化大肠杆菌DH5α,氨苄青霉素筛选阳性克隆,PCR及测序鉴定.结果:连接反应产物转化大肠杆菌DH5α,氨苄青霉素筛选出多个阳性克隆;分别以针对4-1BB胞膜外区和hIgG1Fc的引物进行PCR扩增,电泳后观察到一558bp、708bp的特异性条带,与4-1BB胞膜外区和hIgG1Fc相符,提示构建成功.进一步测序分析证明克隆在pCDNA3质粒中的4-1BB和hIgG1Fc序列和读码框架正确,无基因突变.结论:成功构建人4-1BB胞膜外区-hIgG1Fc融合蛋白真核表达载体,为表达4-1BB融合蛋白奠定基础.
更多相关知识
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1671-7554.2002.01.007
发布时间
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
山东省自然科学基金（(413769)）
- 浏览0
- 被引1
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
