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减毒沙门氏细菌为载体的人乳头瘤病毒双启动子DNA疫苗载体构建

Construction of a DNA vaccine of human papillomavirus type 16L1E7 fusion gene under the control of the HCMV ie and bacterial anaerobic-inducible pronoter nir

摘要目的:构建一种廉价高效的防治宫颈癌的人乳头瘤病毒新型双启动子DNA疫苗.方法:设计合成细菌厌氧诱导启动子Nir,含有FNR顺式反应元件、RBS和真核基因Kozak元件,插入pTriEx真核启动子CMV IE 下游,构建pCMVnir双启动子载体.将人乳头瘤病毒16型L1L7,融合基因,插入pCMVnir,制备pCMVnirL1E7,转化减毒沙门氏细菌SL3261,厌氧诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析检测Nir启动子的活性.结果:经DNA序列和限制性内切酶鉴定分析,成功构建了HPV双启动子DNA疫苗载体pCMVnirL1E7,转化沙门氏细菌SL3261,厌氧条件下可诱导表达HPVL1E7蛋白质.结论:成功构建了一种与胞内寄生细菌(减毒沙门氏细菌)匹配的双启动子DNA疫苗新型载体,并构建了HPV16pCMVnirL1E7新型DNA疫苗.

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