换一批反义c-myc表达载体的构建及其瞬时表达对HepG2.2.15细胞的体外生物学效应
Construction of antisense c-myc expression vector and study on the biological effect of transient expression on HepG2.2.15 cell in vivo
摘要目的:构建反义RNA表达载体pcDNA3.1-as-myc,建立新型的c-myc反义RNA肝癌靶向性转移系统,研究瞬时表达对HepG2.2.15细胞的体外生物学效应.方法:XbaⅠ和HindⅢ双酶切携带目的基因的质粒pcMYC和pcDNA3.1(-)真核表达载体,T4DNA连接酶连接,构建c-myc反义RNA表达载体.合成针对表皮生长因子受体(EGFR)的相应16肽GE7和流感病毒血凝素功能域的HA20寡肽,并与多聚赖氨酸连接,连接物与c-myc的反义RNA表达载体混合,构建新型c-myc反义RNA肝癌靶向性转移系统,即四元复合体.结果:成功构建反义RNA表达载体pcDNA3.1-as-myc,建立了as-myc四元复合体基因转移系统,经HepG2.2.15细胞系瞬时转染,证实c-myc蛋白的表达下降.结论:构建的反义表达载体pcDNA3.1-as-myc具有阻断c-myc表达的效应.
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DOI
10.3969/j.issn.1671-7554.2003.03.001
发布时间
2003-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（39970333）
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