携带双启动子DNA疫苗载体的减毒沙门菌在体内定植及动态变化
Colonization and kinetics of attenuated Salmonella-based Dual-promoter DNA vaccine of HPV16 by inoculating through oral,intranasal and transcutaneous pathways
摘要目的:探讨双启动子DNA疫苗载体在减毒沙门菌中的稳定性和重组减毒沙门菌在小鼠体内的定植及动态变化.方法:将人乳头瘤病毒双启动子DNA疫苗载体pCN-16L1E7转化减毒沙门菌S.SL3261,经口服、鼻饲和皮肤途径免疫小鼠,在免疫后的第3、4、5、6周取小鼠粘膜相关淋巴组织,电镜观察细菌在组织中的定植;组织匀浆,细菌培养计数确定细菌的增殖;从细菌中提取质粒酶切鉴定以确定质粒的稳定性.结果:重组减毒沙门菌.S.SL3261能在小鼠脾脏、肝脏和粘膜相关淋巴组织中定植,电镜可检测到多个细菌定植灶;重组减毒沙门菌可有效进入机体细胞并有限增殖达6周,在第4~5周菌落数量达到高峰,然后逐渐减少以至最后被清除.pCN-16L1E7可在减毒沙门菌中稳定存在,载体的产量和酶切图谱没有明显变化.结论:双启动子DNA疫苗载体pCN-16L1E7与减毒沙门菌有较好的相容性,能够在小鼠体内定植及有限增殖.口服、鼻饲和皮肤粘膜接种途径均可有效地将减毒沙门菌携带的DNA疫苗载体导入粘膜相关淋巴组织.
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