换一批用重组PCR技术缺失突变人单核细胞趋化蛋白-1基因
Mutagenesis of human monocyte-chemoattractant protein-1 by recombinant PCR
摘要目的:用重组PCR技术对人单核细胞趋化蛋白-1(hμMCP-1)基因cDNA进行缺失突变,构建其突变体-7 ND cDNA.方法:根据hμMCP-1基因缺失突变前后的两段基因分别设计两对含有酶切位点的引物,以pBlueScript-hμMCP-1为模板,进行重组PCR反应,将PCR产物与T载体连接进行TA克隆,酶切鉴定并测序确定其长度为342 bp,继之将目的基因克隆入pcDNA3.1真核表达载体.结果:成功构建hμMCP-1cDNA突变体-7ND的真核细胞表达载体,测序结果表明,该突变体N端第2至8位氨基酸缺失.结论:重组PCR技术是十分有效、可靠的基因缺失突变方法.
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栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1671-7554.2004.06.023
发布时间
2005-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（60271015）
卫生部临床学科重点项目（20012943）
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