雄激素应答元件陷阱DNA诱导前列腺癌细胞LNCaP凋亡
Apoptosis of the human prostate cancer cell line LNCaP induced by ARE decoy DNA
摘要目的:研究雄激素应答元件陷阱DNA(ARE decoy DNA)对前列腺癌细胞LNCaP生长活性和凋亡的影响.方法:人工合成双链硫代ARE decoy DNA并提取LNCaP细胞核蛋白,应用电泳迁移率变动分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测ARE decoy DNA与雄激素受体的特异结合.2μg/ml ARE decoy DNA转染LNCaP细胞,48 h后相差显微镜观察细胞超微结构变化:MTT比色法检测细胞生长活性;DNA Ladder检测细胞凋亡;流式细胞技术(FCM)测定细胞凋亡率.结果:EMSA显示,ARE decoy DNA能特异与核蛋白中雄激素受体结合.LNCaP细胞转染ARE decoy DNA后,镜下可见部分细胞出现凋亡形态学的改变,有凋亡小体形成,细胞体外生长受到抑制,DNA Ladder可见明显梯形条带.转染后48 h的凋亡率为22.5%.结论:ARE decoy DNA能竞争结合雄激素受体(androgen receptor,AR),阻断AR的作用而诱导LNCaP细胞凋亡.
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