换一批
换一批摘要目的 构建重组腺病毒HBV preS2/S-AD5,并对其生物安全性进行初步评价.方法 应用clontech公司的第一代腺病毒载体构建重组腺病毒质粒HBV preS2/S-AD5,酶切线性化后分4次用脂质体方法转染HEK293细胞包装成复制缺陷型腺病毒HBVpreS2/S-AD5,分别命名为N1～4.扩增并滴定毒力后,接种Hep2、Hela和A549细胞,观察HBV preS2/S_AD5在非容许细胞的增殖情况;同时,用N1～4分别鼻腔接种SPF级BALB/C小鼠,每日观察小鼠一般情况,第10d取小鼠重要组织并用福尔马林固定,做病理学检查.结果 4株重组腺病毒HBVpreS2/S-AD5第1代N1、第4代N2、第6代N3、第8代N4株接种的细胞未见病变,接种的小鼠无一般状况改变,组织病理也未见任何改变;而第11代N1株重组腺病毒能在非容许细胞增殖并致细胞病变,接种的小鼠出现严重腹泻,并且小鼠肠、肺组织有明显的病理改变.结论 本实验室构建的重组腺病毒HBV preS2/S-AD5有突变为复制型腺病毒的现象,并可导致小鼠出现腹泻和轻型肺部炎症.
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