换一批
换一批人肾脏系膜细胞内mRNA稳定因子HuR蛋白对细胞周期蛋白cyclinD1转录后表达的调节
The mRNA-stabilizing factor Human-Antigen R regulates renal cyclinD1 post-transcriptional expression in human mesangial cells
摘要目的 观察人肾脏系膜细胞在血管紧张素Ⅱ( AngⅡ)刺激下mRNA稳定因子人类抗原R(HuR)蛋白对细胞周期蛋白D1( cyclinDl)蛋白的作用.方法 体外培养人肾脏系膜细胞,根据AngⅡ对其的刺激时间即0、3、6、9、24 h分别记为0A、3A、6A、9A、24A组.应用流式细胞仪检测0A组与24A组细胞周期；免疫细胞化学方法观察各组HuR蛋白的亚细胞定位变化；Western blot方法检测各组全细胞与胞质内HuR蛋白及全细胞cyclinD1表达水平；RT-PCR方法检测各组cyclinD1的RNA水平.干扰RNA方法观察抑制HuR蛋白表达后AngⅡ刺激下对全细胞cyclinD1表达的保护效应.结果 与0A组比较,24A组细胞增殖趋势明显；HuR蛋白亚细胞定位从胞核转移到胞质,其中3A组变化最显著；全细胞HuR蛋白表达水平不变,胞质内HuR蛋白表达增强,其中3A组最显著(P＜0.05)；cyclinD1蛋白表达增强,其中24A组最显著(P＜0.05),而RNA水平保持不变(P＞0.05).与转染前相比,干扰RNA转染后3A组胞质HuR蛋白表达明显减弱(P＜ 0.05)；24A组cyclinD1蛋白表达明显减弱(P＜0.05),而RNA水平不变(P＞0.05).结论 ①AngⅡ可刺激人肾小球系膜细胞增殖；②AngⅡ刺激下人肾脏系膜细胞核内HuR蛋白向胞质内转移；③HuR蛋白参与AngⅡ刺激下cyclinD1蛋白表达过程.
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