换一批
换一批脂多糖所致小鼠睾丸支持细胞GDNF表达减少对精原干细胞的影响
Expression of GDNF in LPS-treated mouse Sertoli cells and its effects on spermatogonial stem cells
摘要目的 探讨脂多糖(LPS)处理后的小鼠睾丸支持细胞(SCs)中胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的变化及该变化对精原干细胞(SSCs)的影响.方法 取5～6周龄昆明小白鼠睾丸组织,分离纯化并培养SCs,将其分为4组:正常对照组(Con组),添加LPS处理1d组(1d组)、2d组(2d组)和3d组(3d组),收集4组培养液作为条件培养液,采用RT-PCR和Western blot检测各组SCs GDNF表达的变化；取5～7d龄昆明小乳鼠睾丸组织,筛选SSCs后分为4组:Con组、Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组,分别用前面的4组培养液培养96 h.通过免疫荧光染色和RT-PCR检测细胞中PLZF、oct4、PCNA和c-kit、sohlh2的表达变化,并通过RT-PCR检测SSCs中Gfrα1、c-ret和Bcl6b、Etv5的表达变化.结果 RT-PCR与Western blot结果显示,SCs GDNF表达按Con、1d、2d、3d组的顺序降低；RT-PCR和免疫荧光染色结果显示,SSCs PLZF、oct4和PCNA的表达按Con、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组顺序降低,而c-kit和sohlh2的表达按Con组、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组顺序升高；SSCs中Gfrα1、c-ret、Bcl6b与Etv5的表达Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组均低于Con组.结论 LPS处理导致小鼠SCs GDNF表达减少,该变化可使SSCs分化加速而其自我更新受到抑制,其机制可能与Bcl6b和Etv5的表达下调有关.
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主题词
睾丸(Testis)细胞(Cells)干细胞(Stem Cells)小鼠(Mice)胶质细胞源性神经营养因子(Glial Cell Line-Derived Neurotrophic Factor)
分类号
R321.1
栏目名称
基础医学
DOI
10.6040/j.issn.1671-7554.2013.03.007
发布时间
2016-11-10
基金项目
国家自然科学基金
山东省自然科学基金
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