地黄多糖诱导大鼠BMSCs向神经样细胞分化中对Notch信号通路的影响
Effect of rehmannia glutinosa polysaccharide on Notch signal pathway in rat bone marrow mesenchymal stem cells during differentiation into neuron-like cells in vitro
摘要目的 探讨地黄多糖诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为神经样细胞过程中对Notch信号通路的影响.方法 以大鼠BMSCs为研究对象,取P3~P5代细胞随机分为正常对照组(CON组)与地黄多糖诱导组(RGP组),诱导后连续培养7d.以免疫细胞化学法和Western blotting检测诱导后0、1、3、7d各时点Notch1、Jagged1蛋白和Notch1胞内段NICD蛋白的表达,Real-time PCR检测Notch信号通路相关分子mRNA.结果 免疫荧光法检测显示,RGP组与CON组比较各时点Notch1蛋白表达阳性率差异有统计学意义(P<0.01),且随时间变化Notch1蛋白表达阳性率逐渐降低;Jagged1蛋白阳性细胞率从诱导结束0d到诱导后1d具有明显的上升趋势,1d到7d显著下降,各时点比较差异有统计学意义(P<0.05),CON组与RGP组各时点比较差异具有统计学意义(P<0.05);Western blotting检测结果与免疫荧光检测结果相似.Real-time PCR检测显示,RGP组Notch1mRNA随时间变化表达下降,Presenilin1表达先降低后略有回升,Hes1表达下降,Mash1表达升高,Jagged1表达先升高后降低,各时点与CON组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 地黄多糖在诱导BMSCs向神经样细胞分化过程中抑制Notch1蛋白的表达,并影响Notch信号通路相关基因的表达.
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