高糖诱导PC12细胞损伤的影响因素及梓醇的保护作用
Influencing factors of PC12 cell injury induced by high glucose and the protective effects of catalpol
摘要目的 探讨不同条件下高浓度葡萄糖(高糖)对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系PC12 细胞的损伤作用,分析建立高糖损伤细胞模型的影响因素,并用确定的细胞模型观察梓醇的保护作用.方法 PC12 细胞种植密度为1×103、1×104、1×105 个/mL,高糖加入时间点分别为细胞种植后 24h 和 48 h,葡萄糖终浓度为 30、40、50 和75 mmol/L,据此分为HG30、HG40、HG50、HG75 组,另外对照组细胞加入等容积生理盐水.分别作用24、48、72 h,MTT法检测细胞存活率.用确定条件建立的细胞损伤模型观察梓醇的保护作用,细胞分为对照组、模型组、梓醇低剂量组(1×10-5mol/L)和梓醇高剂量组(1×10-4mol/L),ELISA法和荧光探针检测细胞活性氧(ROS)含量,ELISA测定乳酸脱氢酶(LDH)的释放量.结果 不同葡萄糖作用条件下,与对照组比较,HG30 组细胞存活率不变或降低(P>0.05 或P<0.05),HG40、HG50 和HG75 组细胞存活率降低(P<0.05 或P<0.01).与对照组比较,模型组的细胞ROS含量增加(P<0.01),LDH释放量升高(P<0.01);与模型组比较,梓醇低剂量组和梓醇高剂量组细胞存活率升高(P<0.01),细胞ROS含量和LDH释放量降低(P<0.01).结论 高糖诱导的PC12 细胞损伤受细胞种植密度、葡萄糖浓度和作用时间等因素影响;以 1×104 个/mL 密度种植细胞、种植后 24h 加入终浓度50 mmol/L葡萄糖作用时长 24 h,可成功建立PC12 细胞高糖损伤模型,梓醇对该细胞模型有保护作用.
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