摘要目的 探讨半乳糖凝集素-3(galectin-3,Gal-3)通过磷脂酰肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B/哺乳动物雷帕霉素靶点(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B/mammalian target of rapamycin,PI3K/Akt/mTOR)通路调控巨噬细胞自噬及极化的作用,为炎性疾病的靶向治疗提供新的理论依据.方法 采用RAW264.7 细胞,实验分为4 组:对照组(不作处理)、模型组(100 nmol/L 雷帕霉素诱导自噬 6 h)、Gal-3 过表达组(Gal-3 OE 组,转染 pcDNA3.1-Gal-3质粒)及敲低组(Gal-3 KD 组,感染 shRNA-Gal-3 慢病毒).采用免疫荧光法检测微管相关蛋白 1 轻链 3B(microtubule-associated protein 1 light chain 3B,LC3B)水平、Western blotting 法检测自噬标志物 p62 及 PI3K/Akt/mTOR 通路相关蛋白;流式细胞术评估巨噬细胞极化(CD86/CD206)及凋亡情况;酶联免疫吸附试验检测炎症因子[(肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素10(interleu-kin-10,IL-10)、转化生长因子 β(transforming growth factor-β,TGF-β)]水平;RT-qPCR 法检测自噬相关基因精氨酸酶 1(arginase 1,Arg-1)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达;荧光染色法测定活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平.结果 与模型组相比,Gal-3 OE 组 p-PI3K、p-Akt、p-mTOR 水平下调(P<0.01),LC3B 升高(P<0.05),差异有统计学意义;CD206 阳性细胞比例、IL-10、TGF-β 及 Arg-1 mRNA 表达升高(P<0.01),iNOSmRNA 表达降低(P<0.01),差异有统计学意义;同时 ROS 水平与细胞凋亡率升高(P<0.05).Gal-3 KD 组则呈现相反效应.结论 Gal-3通过抑制 PI3K/Akt/mTOR 通路参与巨噬细胞自噬及 M2 型极化,伴随 ROS 依赖性凋亡调控.