换一批
换一批摘要目的 体外构建S100A8和S100A9的异源二聚体(S100A8/S100A9),为其分子生物学功能研究提供依据.方法 原核表达载体pET28a-S100A8和pMT28a-S100A9分别转化感受态细胞BL21,并用异丙基硫化-P-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达蛋白,Ni-NTA His柱纯化蛋白,将等量纯化蛋白在一定钙离子浓度下室温孵育30 min,通过SDS-PAGE和Western blot方法验证异源二聚体的形成.结果 质粒pET28a-S100A8和pET28a-Sl00A9在相对分子质量约11 kD和14 kD处出现新生的蛋白条带,可溶性分析发现两个蛋白均可以以可溶的形式存在,纯化后得到了目的蛋白,S100A8和S100A9室温孵育后形成了异源二聚体.结论 Sl00A8和S100A9蛋白可以在体外形成异源二聚体.
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栏目名称
基础研究
DOI
10.3969/j.issn.1002-266X.2011.19.021
发布时间
2011-09-13
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