NF-κB信号通路阻断对内皮细胞增殖的抑制作用观察
Inhibition effect of knockdown of NF-κB signaling pathway by small interference RNA on endothelial cell proliferation
摘要目的 观察内皮细胞的核转录因子( NF)-κB信号通路阻断对内皮细胞增殖的抑制作用.方法 构建NF-κB p65的特异性小分子干扰RNA(siRNA)真核表达载体.取体外培养的大鼠主动脉内皮细胞(SVAREC细胞),随机分为空白对照组、脂多糖(LPS)组、LPS+ HK组和LPS+ p65 siRNA组.除空白对照组外,均予1μg/mlLPS诱导孵育.LPS+ HK组和LPS+ p65 siRNA组分别转染无义序列HK和p65 siRNA真核表达载体.继续培养72 h后用Western blot法检测各组细胞p65蛋白,流式细胞术测算细胞周期,MTT法测算内皮细胞增殖指数及细胞增殖率.结果 NF-κB p65蛋白表达水平量LPS组为0.913±0.073,较空白对照组0.527±0.053明显增高(P<0.05);LPS+HK组为0.926±0.065,与LPS组相比P>0.05,LPS+ p65 siRNA组为0.473±0.071,与LPS组相比P<0.05.LPS组G0/G1期细胞比例较空白对照组显著降低、S期细胞比例、细胞增殖指数及细胞增值率较对照组显著增高(P均<0.05);LPS +p65 siRNA组细胞与LPS组相比G0/G1期比例显著增高,S期细胞比例、细胞增殖指数及细胞增殖率显著降低(P均<0.05),而LPS+ HK组与LPS组比较P均>0.05.结论 NF-κB信号传导通路阻断可抑制内皮细胞增殖.
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