摘要目的 探讨细胞内酸化对自噬的影响.方法 利用pAd-miR-NHE-1病毒悬液转染人源性神经母细胞瘤细胞株,制备NHE-1基因敲低细胞模型.在透射电镜下观察阴性对照组及腺病毒转组转染成功后0.5、2、4、8h自噬体的形成、线粒体形态及溶酶体数目的变化;Western blotting法检测自噬标记物LC3Ⅱ的表达.结果 透射电镜下,阴性对照组线粒体形态及溶酶体数目正常,腺病毒转染成功后0.5~4 h可见线粒体肿胀、变形,溶酶体数目增多,自噬囊泡增多,自噬小体形成.8h可见凋亡小体出现,线粒体数目减少,未见自噬小体,可见少量溶酶体.Western blotting显示,阴性对照组LC3Ⅱ表达较低,腺病毒转染成功后0.5 h LC3Ⅱ表达升高(P<0.01),4h达高峰(P<0.01),8h表达降低,且低于阴性对照组(P<0.01).结论 细胞内酸化可以激活自噬的发生.
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