换一批非必需氨基酸和β-巯基乙醇对神经干细胞增殖的影响
Effects of non-essential amino acids andβ-mercaptoethanol on proliferation of neural stem cells
摘要目的：观察非必需氨基酸（NEAA）和β-巯基乙醇对神经干细胞（NSCs）增殖的影响。方法取孕龄为14．5 d的雌鼠，处死后提取NSCs并培养，取5～7代的NSCs用于实验，将NSCs细胞使用传代培养基培养，并分为四组，对照组：加入磷酸盐缓冲液（ PBS）12μL；NEAA组：加入NEAA 10μL，PBS 2μL；β-巯基乙醇组：加入β-巯基乙醇2μL， PBS 10μL；NEAA＋β-巯基乙醇组：加入NEAA 10μL，β-巯基乙醇2μL。通过细胞计数法计算NSCs的增殖速度，噻唑蓝（ MTT）法测定NSCs增殖率，RT-PCR法测定NSCs中凋亡相关基因含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）的表达，免疫组化法对NSCs进行鉴定并测定NSCs向神经元和星形胶质细胞的分化潜能。结果与对照组比较，NEAA组NSCs增殖速度、增殖率升高，Caspase-3 mRNA降低（ P＜0．05或＜0．01）；β-巯基乙醇组及NEAA＋β-巯基乙醇组NSCs增殖速度、增殖率升高，Caspase-3 mRNA、TUJ-1阳性细胞百分比、GFAP阳性细胞百分比降低，Nestin升高（P＜0．05或＜0．01）。与NEAA组比较，NEAA＋β-巯基乙醇组各项指标差异均有统计学意义（P＜0．05或＜0．01）；与β-巯基乙醇组比较，NEAA ＋β-巯基乙醇组 NSCs 增殖速度、增殖率升高，Caspase-3 mRNA降低（P＜0．05或＜0．01）。结论 NEAA和β-巯基乙醇均能促进NSCs增殖，联合使用起协同作用。
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关键词
神经干细胞非必需氨基酸β-巯基乙醇增殖分化neural stem cellsnon-essential amino acidsβ-mercaptoethanolproliferationdifferentiation
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1002-266X.2016.01.007
发布时间
2016-04-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（31460314）
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