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Notch1基因沉默的人绒毛膜上皮癌细胞增殖及侵袭能力变化

Changes in proliferation and invasive abilities of human chorionic epithelioma cells after silencing Notch1 gene

摘要目的:观察Notch1基因沉默后人绒毛膜上皮癌细胞增殖及侵袭能力变化。方法查阅GenBank提供的Notch1序列(NM-001105721.1)设计引物,合成Notch1 siRNA。分离培养人绒毛膜上皮癌JEG-3细胞,分为A、B、C组。 A组不做转染,B组转染control siRNA ,C组转染Notch1 siRNA。分别于转染后12、24、36、48、60 h采用MTT法检测各组细胞增殖能力( OD值)。转染后48 h采用Transwell 侵袭实验检测细胞侵袭能力。转染后72 h采用Western blotting法检测各组细胞中的MMP-2、MMP-9蛋白。结果转染后36、48、60 h C组OD值低于A、B组( P均<0.05)。 A、B、C组穿膜细胞数分别为(109±6)、(118±7)、(59±4)个,C组与A、B相比,P均<0.05。 A、B、C组细胞中MMP-2蛋白相对表达量分别为0.91±0.08、0.87±0.01、0.29±0.05,MMP-9蛋白相对表达量分别为0.85±0.04、0.79±0.03、0.35±0.05,C组MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量与A、B组相比,P均<0.05。结论Notch1基因沉默后,人绒毛膜上皮癌细胞增殖受到抑制,侵袭能力减弱。

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