换一批
换一批摘要目的 探讨沉默GTPBP4基因对结肠癌细胞(HT29)生物学行为的影响及机制.方法 将培养好的HT29细胞随机分为转染组与阴性对照组,转染组加入适量GTPBP4-RNAi慢病毒,阴性对照组转染含有非特异性干扰序列的阴性病毒.采用CCK8法检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,流式细胞术检测细胞周期,AnnexinV-APC单染法检测细胞凋亡率,细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成情况,Western blotting检测细胞内p53、Survivin蛋白表达,细胞免疫荧光法检测细胞内蛋白p53、Survivin定位.结果 与阴性对照组比较,转染组细胞增殖能力低(P＜0.05),迁移距离短(P＜0.05),穿膜细胞数少(P＜0.05),G1期细胞比例高(P均＜0.05)、S期细胞比例低(P＜0.05),凋亡率高(P＜0.05),细胞克隆形成的细胞集落数目少(P＜0.05),p53蛋白相对表达量高(P＜0.05),Survivin蛋白相对表达量低(P＜0.05).两组p53、Survivin蛋白均主要表达于细胞核,未发生表达位置改变.结论 沉默GTPBP4基因可抑制结肠癌细胞HT29的恶性生物学行为,该作用可能与调节p53、Survivin蛋白表达有关.
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