膀胱癌组织、细胞中长链非编码RNAs H19表达变化及其对细胞增殖的影响和机制
Expression changes of LncRNAs H19 in bladder cancer tissues and cells and its effect on proliferation of bladder cancer cells
摘要目的 观察长链非编码RNAs(LncRNAs)H19在膀胱癌组织及细胞中的表达变化,并探讨其对膀胱癌细胞增殖的影响及机制.方法 收集40例膀胱癌组织、20例正常膀胱组织,培养人膀胱癌细胞EJ、T24、J82和人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1,用qRT-PCR法检测组织细胞中的H19,并分析H19与膀胱癌患者临床病理特征的关系.将H19表达最高的膀胱癌细胞随机分为抑表达组和对照组,用脂质体2000分别转染si-H19、si-NC;转染48 h后收集细胞,采用MTS法测算细胞增殖率、平板克隆实验观察细胞克隆形成能力、流式细胞仪检测细胞周期、Western blotting法检测细胞中的wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin、Cyclin D1和cMYC.结果 膀胱癌组织中H19表达高于正常膀胱组织,T3~T4期膀胱癌组织中H19表达高于T1~T2期(P均<0.01);膀胱癌细胞EJ、T24、J82中H19表达均高于人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1(P均<0.05),其中T24细胞中H19表达最高;与对照组比较,抑表达组T24细胞中细胞增殖率降低,细胞克隆形成数减少,G1期细胞比例增加,细胞中β-catenin、Cyclin D1和cMYC蛋白表达减少(P均<0.05).结论 H19在膀胱癌组织和细胞中高表达,且肿瘤分期越高表达越高;H19降表达可以抑制膀胱癌细胞增殖,其机制可能与抑制wnt/β-catenin信号通路相关下游靶基因的表达有关.
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