CDC25C表达下调的黑色素瘤细胞线粒体应激反应和线粒体途径凋亡情况观察
Effects of down-regulation of CDC25C on mitochondrial stress response and mitochondrial pathway apoptosis in melanoma cells
摘要目的 探讨细胞分裂周期蛋白25C(CDC25C)对黑色素瘤B16细胞线粒体应激反应和线粒体途径凋亡的影响.方法 取黑色素瘤B16细胞进行培养,将细胞随机分为转染组、转染对照组、空白对照组.转染组转染CDC25C低表达慢病毒质粒,转染对照组转染慢病毒空质粒,空白对照组正常培养.利用Rhod-2/AM与MitoSOX荧光探针检测细胞线粒体内Ca2+浓度及线粒体活性氧(ROS),RT-qPCR法和Western blotting法分别检测细胞线粒体应激反应相关分子ClpP、LONP1及线粒体途径凋亡相关分子Caspase-9、Caspase-3 mRNA和蛋白表达.结果 与转染对照组和空白对照组相比,转染组细胞线粒体Ca2+及ROS含量增加,ClpP、LONP1、Caspase-9、Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05或<0.01).结论 CDC25C表达下调激活黑色素瘤B16细胞发生线粒体应激反应,并诱导线粒体途径的细胞凋亡.
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