基于4种染色方法对不同月龄小鼠窦房结组织起搏细胞、移行细胞数量及间质组织成分的观察
Observation of pacemaker cells,transitional cells,and interstitial tissue components in sinoatrial node of mice at different ages using four staining methods
摘要目的 基于HE染色法、改良的Masson三色法、Verh?eff弹力纤维染色法、苦味酸-天狼猩红染色法观察不同月龄小鼠窦房结组织起搏细胞(P细胞)、移行细胞(T细胞)数量及间质组织成分变化.方法 选择C57野生型雄性小鼠20只,其中10日龄小鼠5只作为新生组,3~6月龄小鼠5只作为青年组,10~15月龄小鼠5只作为中年组,18~24月龄小鼠5只作为老年组.各组小鼠处死后取心脏,制作窦房结石蜡切片,采用HE染色法、改良的Masson三色法、Verh?eff弹力纤维染色法、苦味酸-天狼猩红染色法进行窦房结组织细胞学观察,记录其P细胞计数、T细胞计数、P/T细胞比例及总细胞密度、胶原纤维面积占比,Verh?eff弹力纤维染色法观察弹力纤维面积占比.结果 HE染色法观察结果:新生组、青年组、中年组、老年组P细胞计数依次降低,胶原纤维面积占比依次升高(P均<0.05);新生组、青年组、中年组T细胞计数依次升高,而老年组低于青年组、中年组(P均<0.05);新生组、青年组P/T细胞比例高于中年组、老年组,老年组总细胞密度低于其余各组(P均<0.05).改良的Masson三色法观察结果:新生组、青年组、中年组、老年组P细胞计数及P/T细胞比例依次降低,胶原纤维面积占比依次升高(P均<0.05);新生组、青年组、中年组T细胞计数依次升高,而老年组低于中年组(P均<0.05);老年组总细胞密度低于其余各组(P均<0.05).Verh?eff弹力纤维染色法观察结果:新生组、青年组、中年组、老年组P细胞计数依次降低,弹力纤维及胶原纤维面积占比均依次升高(P均<0.05);新生组、青年组、中年组T细胞计数依次升高而P/T细胞比例依次降低,老年组T细胞计数高于青年组而P/T细胞比例低于青年组(P均<0.05);老年组总细胞密度低于其余各组(P均<0.05).苦味酸-天狼猩红染色法观察结果:与新生组比较,中年组、老年组P细胞计数均降低而胶原纤维面积占比均升高,且老年组变化更明显(P均<0.05);青年组、中年组、老年组T细胞计数均高于新生组,中年组高于青年组(P均<0.05);新生组P/T细胞比例高于其余各组,老年组总细胞密度低于其余各组(P均<0.05).结论 随着月龄增长,小鼠窦房结组织P细胞计数呈下降趋势,T细胞计数呈先升高后降低趋势,间质组织中的胶原纤维、弹力纤维逐渐增多,出现间质重构现象.
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