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尾静脉注射WEHI-3细胞法构建AML-M4型白血病小鼠模型

Construction of a mouse model of AML-M4 leukaemia by tail vein injection of WEHI-3 cells

摘要目的 采用尾静脉注射WEHI-3细胞法构建小鼠AML-M4型白血病小鼠模型,为该型白血病的研究提供实验模型.方法 20只BALB/c小鼠随机分为空白组及模型组,每组10只,模型组小鼠通过尾静脉注射WEHI-3细胞溶液(细胞密度为5×107/mL)0.2 mL,空白组小鼠通过尾静脉注射等剂量的无菌PBS.将尾静脉注射的前1 d记为D0,注射当天记为D1,观察直至D29.自D0开始,每日观察两组小鼠的生理状态,包括摄食饮水量、精神状态、毛发状态、自主活动频率及运动协调性等.D0、D7、D14、D21及D28时,称取两组小鼠体重,观察小鼠体重变化情况.D0、D7、D14、D21、D28时眼眶取血,采用全自动血细胞分析仪检测外周血中白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT).D28时取外周血制作血涂片,D29时取股骨骨髓制作骨髓涂片,显微镜下观察小鼠外周血和骨髓细胞形态.结果 空白组小鼠生理状态无异常;模型组小鼠在D7~D14阶段出现饮食及自主活动减少、毛发蓬松无光泽,D14~D21阶段出现饮食及自主活动持续减少、毛发紊乱、精神萎靡及脊柱后凸呈弓背姿势的情况;D21~D28阶段出现身形枯瘦、肌肉萎缩及步态不稳等情况.模型组小鼠D7、D14、D21及D28时体重均低于D0时,且均低于同时点空白组小鼠体重(P均<0.05).模型组小鼠D7、D14、D21、D28时外周血中WBC计数均高于D0时,且均高于同时点空白组(P均<0.05);模型组小鼠D21、D28时外周血中RBC计数均低于D0时,且均低于同时点空白组(P均<0.05);模型组小鼠D14、D21、D28时外周血中HGB水平低于D0时,且均低于同时点空白组(P均<0.05);模型组小鼠D7、D14、D21、D28时外周血中PLT计数均低于D0时,且均低于同时点空白组(P均<0.05).空白组小鼠外周血涂片呈现正常血细胞分布特征;模型组小鼠外周血涂片中单核细胞比例明显增加,外形为圆形或不规则;核仁多为一个,圆形或不规则形,为深紫红色,偶见分叶形;胞质量多,呈灰蓝或淡粉色.空白组小鼠骨髓细胞形态规则,未见病理性细胞或核异常.模型组小鼠骨髓中可见原始细胞及幼稚细胞异常增多,细胞呈圆形或类椭圆形;胞核形态异常,染色质呈纤细疏松网状结构,可见核膜凹陷及折叠,核仁数目增多且体积增大;胞质嗜碱性增强,含少量空泡.结论 采用尾静脉注射WEHI-3细胞法成功构建了AML-M4型白血病小鼠模型,模型小鼠体重下降,外周血WBC升高,外周血HGB、RBC及PLT降低,外周血单核细胞增多,骨髓中原始细胞及幼稚细胞异常增多,符合AML-M4型白血病病理特征.

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山东医药

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2025年65卷7期

60-65页

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