IgA肾病大鼠肾组织和尿液外泌体中IL-6、MCP-1 mRNA表达变化及其与肾损伤程度的关系
Expression changes of IL-6 and MCP-1 mRNA in renal tissues and urinary exosomes of rats with IgA nephropathy and their relationship with the degree of renal injury
摘要目的 探讨免疫球蛋白A(IgA)肾病大鼠肾组织及尿液外泌体中白细胞介素6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)mRNA的表达变化,分析其与肾损伤程度的关系.方法 将40只SD大鼠随机分为对照组(10只)和模型组(30只).模型组采用脂多糖(LPS)+四氯化碳(CCl?)+牛血清白蛋白(BSA)改良法制备IgA肾病模型.分别于造模第10、12周末各随机选取10只、第14周末选取剩余8只模型组大鼠,收集24 h尿液及血液标本,处死后取肾组织.检测24 h尿蛋白定量(24 h UP)及血清生化指标;苏木精-伊红、PASM、Masson染色及IgA免疫荧光染色观察肾组织病理变化,用肾小球病理积分评估肾病理损伤程度,计算肾小球细胞外基质面积(GECMA)/肾小球面积(GA);实时荧光定量PCR法检测肾组织及尿液外泌体中IL-6、MCP-1 mRNA表达;免疫组化SP法检测肾组织IL-6、MCP-1蛋白表达;Pearson相关法分析各指标间的相关性.结果 与对照组比较,模型组造模第10周末24 h UP、肾小球病理积分、GECMA/GA及肾组织IL-6、MCP-1蛋白表达高(P均<0.05),而肾组织及尿液外泌体中IL-6、MCP-1 mRNA表达差异无统计学意义(P均>0.05),肾组织发生典型的IgA肾病病理改变.模型组造模第10、12、14周末,24 h UP、总胆固醇、肌酐、肾小球病理积分、GECMA/GA、肾组织及尿液外泌体中IL-6与MCP-1 mRNA表达、肾组织中IL-6与MCP-1蛋白表达均逐渐升高,血清白蛋白水平逐渐降低(P均<0.05).相关性分析显示,IgA肾病大鼠肾组织及尿液外泌体中IL-6、MCP-1 mRNA表达与肾小球病理积分、GECMA/GA、24 h UP、总胆固醇、肌酐水平呈正相关(P均<0.05),与血清白蛋白水平呈负相关(P均<0.05).尿液外泌体与肾组织外泌体中IL-6、MCP-1 mRNA表达均呈正相关(P均<0.05).结论 IgA肾病大鼠肾组织及尿液外泌体中IL-6、MCP-1 mRNA表达上调,与肾损伤程度密切相关.
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