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荆条种子无菌萌发过程中污染菌的分离鉴定及抑菌剂筛选

Isolation,Identification of Contaminating Fungi and Screening of Fungistatic Agents in Sterile Germination Process of Seeds of Vitex negundo

摘要荆条具有生态、观赏、药用及实用等方面的价值,但在荆条快速繁殖体系的建立中发现,种子在无菌萌发过程中污染率极高,达50%~75%.为降低荆条种子无菌萌发过程中的污染率,试验通过鉴定其主要污染菌株,筛选出有效抑菌剂,并利用组织分离法对污染菌进行分离和纯化;同时,通过光学显微镜和扫描电镜对污染菌的分生孢子进行细胞学观察,然后采用真菌rDNA基因的ITS序列通用引物进行分子生物学鉴定,最后选择百菌清、代森锰锌、多菌灵、氟吗锰锌4种杀菌剂添加到PDA培养基中进行抑菌效果分析.结果表明,主要污染菌为种子表面附着的真菌,菌落呈绒状黄绿色同心圆形,菌丝为有隔褐色分支状菌,分生孢子为橄榄棕色、有隔、梭型;细胞学和分子生物学鉴定表明,该污染菌为链格孢菌.抑菌研究结果发现,60%氟吗锰锌对链铬孢菌的抑制效果最佳,菌落直径最小.将60%氟吗锰锌稀释1400倍添加到荆条种子无菌萌发培养基(水琼脂培养基)中,污染率明显下降到5.5%.荆条种子无菌萌发中主要污染菌为链格孢菌,60%氟吗锰锌对其抑制效果最佳.

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