益肺汤调控TGF-β1/Smad2通路抗肺纤维化机制研究
Mechanism of Yifei decoction regulating TGF-β1/Smad2 signaling pathway against pulmonary fibrosis
摘要目的:研究益肺汤含药血清对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的肺成纤维细胞(NIH-3T3)的影响,探讨其抑制肺纤维化的作用机制.方法:采用SPF级C57小鼠灌胃益肺汤,1次/d,连续给药3 d制备含药血清.实验分为正常对照组、模型组、模型+正常血清组、模型十含药血清组,给药48 h后0.1%FBS的培养基饥饿处理24 h,100 ng/μl的Ang Ⅱ诱导造模24 h.免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA);免疫荧光检测Smad2;Western blot检测Ⅱ型胶原蛋白(ColⅠ)、α-SMA、纤维连接蛋白(FN)、Smad2;ELISA检测细胞上清转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达情况.结果:Western blot和免疫荧光显示,造模后,α-SMA、FN、Col Ⅱ、Smad2的蛋白相对表达显著升高,差异具有统计学意义(均P<0.05).益肺汤含药血清干预48 h后造模,α-SMA、FN、Smad2、Col Ⅱ的相对量较模型组下降(均P<0.05).ELISA结果显示,造模后,TGF-β1的相对表达显著升高(P<0.05),益肺汤含药血清干预48 h后,TGF-β1相对量较模型组下降(P<0.05).结论:益肺汤含药血清对Ang Ⅱ诱导的NIH-3T3有一定影响,可有效减轻肺纤维化,其作用机制可能与调控TGF-β1/Smad2信号通路,降低α-SMA、Col Ⅱ、FN的表达有关.
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