摘要目的:探讨丹芪化瘀方含药血清对LED冷光源致人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)光损伤的防治作用及最佳药物剂量,探寻其可能存在的保护机制.方法:应用健康的SD大鼠制备丹芪化瘀方空白血清和含药血清,将0％(空白血清)及5％、10％、15％、20％含药血清作用于ARPE-19细胞,每组设6个复孔.各组加入相应的药物于细胞恒温培养箱中培养24 h后采用CCK-8检测细胞活力,筛选最佳含药血清浓度进行后续实验.实验设置对照组、空白血清组、低剂量、中剂量、高剂量含药血清组培养,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、内皮素-1(ET-1)mRNA表达;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测一氧化氮合成酶(NOS)、一氧化氮(NO)、血管内皮生长因子(VEGF)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测对照组、空白血清组、高剂量组iNOS的蛋白表达水平.结果:筛选出16％丹芪化瘀方含药血清作为后续实验干预浓度.与对照组比较,空白血清组iNOS、ET-1 mRNA表达及NOS、NO、VEGF含量均升高(P＜0.001),eNOS mRNA表达降低(P＜0.001);随着含药血清浓度的增加细胞中iNOS、ET-1 mRNA表达及NOS、NO、VEGF含量逐渐降低,eNOS mRNA表达增加(P＜0.001),与低、中剂量组相比,高剂量组的iNOS、ET-1 mRNA 表达及 NOS、NO、VEGF 含量显著降低(P＜0.001 或 P＜0.01 或 P＜0.05),eNOS mRNA 显著升高(P＜0.001或P＜0.05);空白血清组iNOS蛋白水平明显高于对照组,而16％含药血清的iNOS蛋白水平明显低于空白血清组(P＜0.001).结论:丹芪化瘀方含药血清可能通过抑制iNOS/NO途径减轻细胞损伤,上调eNOS表达,下调ET-1、VEGF的表达,抑制脉络膜新生血管形成并改善血-视网膜屏障功能,从而发挥保护作用.