非同位素mRNA差异显示方法的建立及应用
Differential Display of mRNAs by a PCR- based Method Without the Use of Radioisotopes
摘要目的 建立非同位素mRNA差异显示技术,并用以分析鼠脑甲状腺激素的反应基因。方法 用9-10bp的随机但序列确定的引物扩增甲减和正常大鼠脑cDNA,用PAGE分析PCR产物,EB染色,切取差异条带,再扩增、测序并作同源性分析。结果 得到两个(226、279bp)受甲状腺激素上调、一个(278bp)受甲状腺激素下调的片段,前二者与任何已知基因的同源性都低于80%,提示为两个尚未报道的新基因,后者即大鼠G蛋白Go的α亚单位基因。结论 非同位素mRNA差异显示技术是一种快速、简便、灵敏的分离差异表达基因的方法 。
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