RCCS中犬成骨细胞-nBGC复合物联合培养的实验研究
An Experimental Study on Canine Osteoblasts Coculture with nBGC Scaffold in RCCS
摘要目的探讨联合应用成骨细胞、活性玻璃/胶原纳米复合材料(nBGC)和旋转式细胞培养系统(RCCS)体外构建组织工程化骨的可行性. 方法采用骨片组织培养法,分离培养犬皮质骨成骨细胞,传代培养至第2代后,利用浸泡接种方法,形成成骨细胞-nBGC支架复合物,然后在RCCS中培养.扫描电镜观察和上清液分析了解nBGC支架上成骨细胞生长、胞外基质沉积和成骨表型维持的情况. 结果成骨细胞吸附于nBGC支架表面,表面可见颗粒状分泌物和丝状胶原纤维,形成三维结构的细胞外基质;上清液生化分析显示,成骨细胞分泌大量Ⅰ型胶原、骨特异性碱性磷酸酶(B-AKP)和骨钙素(OCN),且分别在18、24和30d达分泌高峰. 结论nBGC材料和RCCS可以为成骨细胞提供良好的生物学环境,三者联合应用有望成为构建组织工程骨的理想方法.
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