人类稀少精子细管法超快速冷冻的实验研究
Research on ultra-rapid cryopreservation of small numbers of human spermatozoa in capillary
摘要目的 研究人类稀少精子超快速冻存方法,寻求稀少精子冷冻保存的最优方式.方法 选取20份在上海市人类精子库捐精的20名健康志愿者的精液.将精液稀释后密度调至(3 ~5)×106/mL(每个高倍视野3~5条精子),按照不同冷冻方式分为四组进行冷冻:A组应用0.5mL麦管和精子冷冻剂,以程序降温方式冷冻;B组应用毛细玻璃管和精子冷冻剂,以程序降温方式冷冻;C组应用毛细玻璃管和改良甘油-卵黄-枸橼酸钠( GYC)型冷冻保护剂,以程序降温方式冷冻;D组应用毛细玻璃管和改良GYC型冷冻保护剂,以超快速降温方式冷冻.比较四种方法复苏后精子活率和正常形态率.结果 冷冻前精子活率为(68.6±21.3)%;A、B、C、D组复苏后活率分别为(32.2±17.2)%、(41.5±18.4)%、(44.9±18.0)%和(50.2±19.7)%,B、C、D各组复苏后活率高于A组(P<0.05),D组高于其他三组(P<0.05).冷冻后A、B、C、D组精子正常形态率分别为(14.2±4.1)%、(15.0±4.7)%、(14.5±5.2)%和(15.9±4.9)%,差异无统计学意义(P>0.05).结论 应用超快速降温冷冻模式冷冻稀少精子,具有较高的冷冻复苏率.改良GYC冷冻保护剂具有与精子冷冻剂相似的冷冻保护效果.
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