换一批重组大鼠α2巨球蛋白的表达、纯化及结晶
Expression, purification, and crystallization of recombinant ratα2 macroglobulin
摘要目的·获取高纯度的大鼠α2巨球蛋白(Rα2M),并对蛋白结晶进行筛选,以期获取高分辨率衍射数据,为后续结构生物学研究奠定基础.方法·将Rα2M基因克隆到真核表达载体pCEP4中,使用PEI介导的瞬时转染方法在HEK293EBNA细胞中表达重组蛋白Rα2M.采用阴离子柱交换层析和镍柱亲和层析技术从表达培养基中提纯Rα2M,对纯化蛋白进行结晶筛选和优化.结果·经纯化后,得到相对分子质量约为180 000的重组蛋白Rα2M的全长蛋白,以及被切割后的大片段和小片段.通过结晶筛选和优化后,得到了Rα2M的蛋白晶体.结论·获得了可用于晶体衍射的Rα2M蛋白晶体,为后续的结构解析奠定了基础.
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DOI
10.3969/j.issn.1674-8115.2016.12.001
发布时间
2017-02-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（(31170724)(National Natural Science Foundation of China,31170724)）
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