换一批
换一批鼠伤寒沙门菌中甲基化修饰调控PhoP活性的机制研究
Role of methylation in regulating PhoP activity in Salmonella enterica serovar Typhimurium
摘要目的·探究鼠伤寒沙门菌转录调控因子PhoP的甲基化修饰与其活性的相关性,筛选PhoP的甲基转移酶.方法 ·Western blotting检测不同培养条件下鼠伤寒沙门菌中PhoP的甲基化水平变化.通过生物信息学预测候选的甲基转移酶,体内过表达预测的甲基转移酶后检测phoP及其下游基因的转录水平变化,找到可能的PhoP甲基转移酶,并体外验证该甲基转移酶能否甲基化PhoP.使用real-time PCR检测高浓度Mg2+、弱酸性等培养条件下,phoP与其甲基转移酶在转录水平的相对表达变化.结果·随着培养基中Mg2+浓度升高,PhoP甲基化水平上升;而经过弱酸刺激后,PhoP甲基化水平下降.生物信息学预测并筛选到9个甲基转移酶,其中体内过表达STM14_0023后,phoP及其下游基因的转录水平下降且PhoP蛋白水平也下降,但敲除STM14_0023对上述分子的表达无影响.体外甲基化酶促反应显示STM14_0023能够甲基化PhoP,体内过表达STM14_0023后也可提高PhoP的甲基化水平,且在抑制phoP表达的高浓度Mg2+培养条件下STM14_0023的转录水平升高.结论 ·STM14_0023是PhoP的甲基转移酶,甲基化修饰抑制PhoP活性.
更多相关知识
主题词
甲基化(Methylation)鼠伤寒沙门菌(Salmonella typhimurium)肿瘤转移(Neoplasm Metastasis)研究(Research)毒力(Virulence)
分类号
R37
栏目名称
基础研究
DOI
10.3969/j.issn.1674-8115.2019.08.004
发布时间
2019-10-18
基金项目
国家自然科学基金
- 浏览223
- 被引0
- 下载17
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
