摘要目的·将Cre/loxP重组酶系统与拔牙模型相结合,探究分泌Ⅰ型胶原蛋白(collagen type Ⅰ,COL1)的Col1+细胞在牙槽窝愈合过程中的时空分布规律及其向成骨细胞的分化潜能.方法·将Col1-CreERT2小鼠与Rosa26-LoxP-Stop-LoxP-tdTomato小鼠交配繁殖,以获得Col1-CreERT2;tdTomato双转基因子代小鼠.取15只子代小鼠,通过腹腔注射他莫昔芬(tamoxifen,TA)标记Col1+细胞谱系,1周后于全身麻醉下完整拔除子代小鼠右侧上颌第一磨牙,以构建双转基因小鼠拔牙模型.将子代小鼠分为5组(每组3只),分别在0、3、7、14、28 d取小鼠上颌骨样本,通过石蜡切片观察Col1+细胞谱系在牙槽窝愈合过程中的动态分布;利用免疫荧光技术标记成骨细胞特异性转录因子(osterix,OSX)、血管标志物内皮黏蛋白(endomucin,EMCN)、神经元标志物β3微管蛋白(β3-tubulin)探究Col1+细胞的成骨潜能及其与血管、神经的空间定位关系.结果·成功构建了Col1-CreERT2;tdTomato双转基因小鼠拔牙模型.石蜡切片观察的结果显示:建模后第3日,牙槽窝中出现Col1+细胞;第7日,Col1+细胞的数量增加,牙槽窝逐渐成骨;第28日,Col1+细胞的比例进一步上升,且分布于骨小梁周围.统计结果显示,Col1+细胞数量在牙槽窝愈合过程中随时间的推移而增加(与第0日相比,均P<0.001).免疫荧光技术检测的结果显示,建模后第7～28日,牙槽窝内Col1+OSX+双阳性细胞数量逐渐增多,Col1+细胞在空间定位上分别与EMCN和β3-tubulin相邻.结论·在牙槽窝愈合过程中,Col1+细胞具有向成骨细胞分化的潜能,还可能参与血管、神经生成.