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人卵透明带蛋白ZP3a和ZP3b肽段的免疫原性及其抗血清体外抑制人精子-半透明带结合

Immunogenicity of recombinant human zona pellucida-3 peptides expressed in E. coli and efficacy of their antisera to inhibit in vitro human sperm-egg binding

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摘要分析大肠杆菌表达的重组人卵透明带-3(r-huZP3)蛋白两个肽段(r-huZP3a22～176及r-huZP3b177～348)的免疫原性,比较两者抗血清体外抑制人精子-半透明带结合的能力.以制备性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)纯化的大肠杆菌表达蛋白为抗原,主动免疫新西兰兔产生抗huZP3a22～176及huZP3b177～348抗血清;通过ELISA测定比较两者的抗体应答水平;以蛋白印迹和免疫组化方法测定两者抗血清同重组表达蛋白、天然人卵ZP以及卵巢组织的反应性;通过竞争性半透明带结合试验(hemizona assay,HZA)观察两者抗血清体外抑制人精子-ZP结合能力.结果显示:未与大分子蛋白载体耦联的r-huZP3a22～176和r-huZP3b177～348抗原都在免疫兔中产生了较高的抗体滴度,而且它们的抗血清可识别大肠杆菌表达的各自重组ZP3肽以及人卵细胞表面天然ZP,两者抗血清也都能在体外抑制人精子-ZP结合.由此可见,r-huZP3a22～176及r-huZP3b177～348蛋白具有良好免疫原性,所产生抗血清也都显示出细胞和组织特异性.因此,单一或合并两个huZP3肽段均可作为抗原研制检测不明原因性不孕妇女中是否存在抗自身ZP抗体的诊断试剂盒,另外它们的抗血清也能用于鉴定已知huZP3表位肽段的最小B-细胞表位基序.

作者宋力雯 ^[1] 汪玉宝 ^[2] 倪崖 ^[3] 何亚萍 ^[2] 洪爱真 ^[2] Elvira Hinsch ^[4] Klaus-Dieter Hinsch ^[5] 周思畅 ^[3] 袁玉英 ^[3] 石其贤 ^[3] 徐万祥 ^[2] 学术成果认领

作者单位复旦大学上海医学院,上海 200032;上海市计划生育科学研究所,上海,200032 ^[1] 上海市计划生育科学研究所,上海,200032 ^[2] 浙江省医学科学院,杭州,310013 ^[3] 皮肤与男科学中心,Juetus Liebig 大学,吉森 35392,德国 ^[4] 支薪雇员公共机构联邦保险Riff康复门诊部,Borkum 26757,德国 ^[5]

关键词人卵透明带重组ZP3肽抗血清卵母细胞半透明带结合试验

医学主题词透明带(Zona Pellucida)人(Persons)免疫血清(Immune Sera)蛋白(Egg White)性(Sex)

分类号 Q492.6（生殖生理学）

栏目名称

研究论文

DOI 10.3321/j.issn:0371-0874.2005.06.003

发布时间 2006-02-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

上海市计生委资助项目（03JG05014）浙江省医学科研项目（2004A002）