一种提高海兔神经节成像清晰度的清晰化技术

A clarifying method that improves imaging of Aplysia ganglia

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摘要无论在脊椎动物还是无脊椎动物中,提高神经环路的成像效果对于神经环路的功能研究都是必不可少的.因此,一种新的基于鼠脑的成像技术——清晰化技术(CLARITY),正吸引越来越多的研究者将它运用到其它物种中.这里我们将改进过的清晰化技术应用于无脊椎动物海兔的神经节的清晰化成像中.改进之处包括为海兔神经节修改了水凝胶溶液配方并设计了一个专用的容器.我们使用预先经过免疫组化处理的神经节,再使用改进的清晰化技术.我们采用荧光和共聚焦成像检查这些技术的相容性以及成像效果的改善程度.结果显示,这种改进过的清晰化技术确实可以使样本更清晰,并且进一步提高了海兔神经节中神经肽CP2免疫阳性神经元的清晰度.例如,这种方法提高了神经节深处的一些弱免疫阳性神经元的可视化效果.这种改良方法使得清晰化技术不仅更适合海兔整体神经节的结构成像,也会对其它的无脊椎动物神经节的成像起到帮助作用.

作者陈婷婷 ^[1] 郁炜 ^[1] 刘丹丹 ^[1] 余可 ^[1] 陈宋安 ^[1] 王晔 ^[1] 杨少忠 ^[1] 贾若楠 ^[1] 郑予桐 ^[1] 黄振 ^[1] Ferdinand S Vilim ^[2] 董磊 ^[1] Elizabeth C Cropper ^[2] Klaudiusz R Weiss ^[2] 景键 ^[3] 学术成果认领

作者单位南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室,生命科学高等研究院,南京210046 ^[1] 西奈山伊坎医学院神经科学系和弗里德曼脑研究所,纽约NY10029,美国 ^[2] 南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室,生命科学高等研究院,南京210046;西奈山伊坎医学院神经科学系和弗里德曼脑研究所,纽约NY10029,美国 ^[3]

关键词清晰化技术成像改进神经结构海兔免疫组化 CLARITY imaging enhancement neuronal structure Aplysia immunohistochemistry

分类号 Q-334 Q-336 Q421

栏目名称

实验方法

DOI 10.13294/j.aps.2017.0021

发布时间 2017-09-27

基金项目

the National Natural Science Foundation of China （31371104,31671097,J1103512 and J1210026）