壳聚糖温敏凝胶负载釉基质蛋白对骨髓基质细胞的作用
Effects of enamel matrix proteins loaded in chitosan thermosensitive hydrogel on bone mrrow stronal cells in vitro
摘要目的:探讨在壳聚糖温敏凝胶支架材料中釉基质蛋白(enamel matrix proteins,EMPs)对骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)增殖和碱性磷酸酶(alkaline phosphate,ALP)活性的影响.方法:合成壳聚糖温敏凝胶并加入适当浓度的EMPs,通过考马斯亮蓝试剂盒检测其对EMPs的缓释作用.用全骨髓培养法获得大鼠BMSCs.含10%胎牛血清的DMEM培养液进行原代培养.含EMPs浓度分别为0、50、100、150μg/mL DMEM培养液培养第3代大鼠BMSCs,MTT法测定各组细胞的增殖活性.MTT法及ALP试剂盒检测大鼠BMSCs在负载100μg/mL EMPs及不负载EMPs的壳聚糖温敏凝胶支架材料中的增殖情况及ALP的活性.采用SPSS11.0软件包对实验数据进行单因素方差分析及两样本t检验.结果:EMPs可在壳聚糖温敏凝胶中持续释放3周以上.DMEM培养液中,50μg/mL EMPs组从实验的第3天开始,显著促进大鼠BMSCs的增殖(P<0.01).壳聚糖温敏凝胶负载100μg/mL EMPs后.于实验的第3天和第5天明显促进大鼠BMSCs的增殖(P<0.05)并且在实验的第7天(P<0.05)和第9天(P<0.01)显著促进大鼠BMSCsALP水平的提高.结论:壳聚糖温敏凝胶对EMPs具有缓释性,负载EMPs后,可以促进大鼠BMSCs增殖,提高ALP的活性.
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