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lncRNA USP2-AS1 调节 miR-299-3p/MMP2 轴对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响

lncRNA USP2-AS1 regulates the proliferation,apoptosis,and epithelial-mesenchymal transition of non-small cell lung cancer cells via the miR-299-3p/MMP2 axis

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摘要为探究lncRNA USP2-AS1调节miR-299-3p/基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)轴对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响,将si-NC、si-USP2-AS1、si-USP2-AS1+inhibitor NC 和 si-USP2-AS1+miR-299-3p inhibitor 分别转染至 A549 细胞并分别命名为相应组别,未做任何处理的A549细胞记为NC组.qRT-PCR检测正常人肺上皮细胞系BEAS-2B及A549细胞中lncRNA USP2-AS1、miR-299-3p的表达;CCK-8法检测A549细胞的增殖活性;流式细胞术检测A549细胞的凋亡率;Transwell法检测A549细胞的侵袭、迁移数量;Western blotting检测A549细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、N-cad、波形蛋白和MMP2的蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因法验证lncRNA USP2-AS1、miR-299-3p及MMP2的关系;裸鼠异种移植试验检测肿瘤细胞的在体生长情况.结果显示,与BEAS-2B细胞相比,A549细胞lncRNA USP2-AS1、MMP2表达量显著上调(均P＜0.05),miR-299-3p表达显著下调(P＜0.05).与NC组、si-NC组相比,si-USP2-AS1组A549细胞增殖活性,迁移、侵袭细胞数量,lncRNA USP2-AS1表达量,N-cad、波形蛋白表达量均显著下调(均P＜0.05),A549细胞凋亡率、miR-299-3p表达、E-cad蛋白表达量均显著上调(均P＜0.05);与NC组、sh-NC组相比,sh-USP2-AS 1组移植瘤体积、质量均显著下降(均P＜0.05),而抑制miR-299-3p表达减弱了沉默lncRNA USP2-AS1抑制A549细胞增殖、迁移、侵袭和肿瘤生长及促进凋亡的效应;lncRNA USP2-AS1负向调控miR-299-3p/MMP2轴.由此,沉默lncRNA USP2-AS1可能通过上调miR-299-3p下调MMP2表达,进而对A549细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭以及EMT产生影响.