换一批鲫鱼淋巴细胞转化PHA刺激剂量及流式细胞仪检测参数探讨
The studies of the optimum PHA concentration to the transformation of lymphocytes of crucian carp (Carassius auratus gibelio) and the parameter of flow cytometry on fish
摘要从异育银鲫外周血中分离淋巴细胞,利用RPMI-1640培养基培养48 h后,采用流式细胞仪分析方法研究不同浓度的植物凝集素(phytohemagglutinin, PHA) (0 μg/mL、80 μg/mL、200 μg/mL、400 μg/mL、600 μg/mL、800 μg/mL、1 000 μg/mL、1 200 μg/mL)对外周血淋巴细胞转化率的影响,旨在探索异育银鲫外周血淋巴细胞体外转化最适刺激剂量.结果表明:(1)在PHA浓度0～400 μg/mL的范围内,随着PHA浓度的增加,淋巴细胞转化率也增加,呈浓度依赖的关系,但当PHA的浓度增加到1 200 μg/mL,淋巴细胞转化率明显下降.其中PHA浓度为400 μg/mL时,淋巴细胞转化率最高,显著高于低浓度组(80 μg/mL)和高浓度组(1 000 μg/mL、1 200 μg/mL)(P<0.05),略高于中浓度组(200 μg/mL、600 μg/mL、800 μg/mL),差异不显著(P>0.05).由此可见,在本试验条件下,PHA体外刺激异育银鲫淋巴细胞转化的最适剂量为400 μg/mL.(2)用流式细胞仪检测细胞内DNA合成情况,Multicycle AV软件进行细胞周期分析,通过DNA增殖指数测定淋巴细胞转化率是一种简单、可靠的方法.需要注意的是,采用流式细胞仪测定鲫鱼淋巴细胞转化率时,FS/SS参数设置为FS: Volts 62-gain 100;SS: Volts 1000-gain 500能够获得清晰的图像.
更多相关知识
关键词
异育银鲫淋巴细胞转化流式细胞仪DNA增殖指数crucian carplymphocyte transformationflow cytometryDNA proliferation index
分类号
S917
栏目名称
发布时间
2010-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
- 浏览5
- 被引2
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
