摘要目的 探讨微RNA(microRNA,miRNA或miR)-887-3p对大鼠椎间盘纤维环细胞增殖和凋亡的影响及其潜在的分子机制.方法 取8周龄SPF级雄性SD大鼠的纤维环组织,离心制备并鉴定纤维环细胞.实验随机分为4组:正常组(Normal group)是不做任何处理的原代纤维环细胞;对照组(Control group)用10 ng/mL白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)处理纤维环细胞24h,形成退变细胞模型;干扰组(miR-887-3p inhibitor)是在对照组的基础上用Lipo3000转染miR-887-3p抑制子;过表达组(miR-887-3p mimics)是在对照组的基础上用Lipo3000转染miR-887-3p模拟物.采用CCK-8法检测各组细胞活力;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;实时荧光定量PCR法检测miR-887-3p和鼠双微体4(murine double minute 4,MDM4)mRNA的表达;蛋白质印迹法检测MDM4、Bcl-2和Caspase-3的蛋白表达水平.结果 免疫荧光染色法鉴定分离培养的细胞发现,大鼠椎间盘纤维环细胞中Collagen I的阳性率在90％以上,提示纤维环细胞纯度大于90％.实时荧光定量PCR结果显示,利用IL-1β 构建纤维环退变细胞模型后,miR-887-3p表达水平与正常组相比显著上升(P＜0.001);与对照组相比,转染miR-887-3p抑制子后,miR-887-3p表达水平显著下降(P＜0.001).CCK-8法检测结果表明,与正常组相比,对照组细胞活力显著下降(P＜0.001);与对照组相比,抑制miR-887-3p的表达后,细胞增殖能力显著增强;miR-887-3p过表达后,细胞增殖能力显著下降.流式细胞仪检测结果表明,与正常组相比,对照组的细胞凋亡率显著增加(P＜0.001);与对照组相比,miR-887-3p干扰组的细胞凋亡率显著降低(P＜0.001),miR-887-3p过表达组的细胞凋亡率显著增加(P＜0.001).蛋白质印迹法检测结果发现,与正常组相比,对照组中Bcl-2的表达水平显著降低(P＜0.001),Caspase-3的表达水平显著升高(P＜0.001);与对照组相比,miR-887-3p干扰组中Bcl-2和MDM4表达水平显著升高(P＜0.01),Caspase-3的表达水平显著降低(P＜0.01);而miR-887-3p过表达组中Bcl-2和MDM4表达水平显著降低(P＜0.05),Caspase-3的表达水平显著升高(P＜0.05).实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹结果显示,干扰miR-887-3p后,MDM4蛋白和mRNA的表达增加(P＜0.001);过表达miR-887-3p后,MDM4蛋白和mRNA的表达降低(P＜0.01,P＜0.001).结论 miR-887-3p可能通过调控MDM4的表达来影响大鼠椎间盘纤维环细胞的增殖和凋亡,进而影响椎间盘退变的发生和发展.