摘要目的 探讨活体探头式激光共聚焦成像(probe-based confocal laser endomicroscopy,pCLE)技术在快速检测与评估小鼠消化道组织形态特征中的应用价值.方法 将12只6周龄的SPF级雄性昆明小鼠随机分为两组,其中6只使用乙醇体积分数为52％的红星牌二锅头白酒进行灌胃造模,另外6只使用生理盐水灌胃作为对照.连续灌胃28d后,每组随机选取3只,经3％异氟烷吸入深度麻醉后颈椎脱臼处死,即刻剖取胃、十二指肠、空肠和直肠组织,浸入1％荧光素钠溶液染色,采用pCLE技术观察各组织黏膜表面的微观结构.剩余模型组和对照组小鼠经3％异氟烷吸入深度麻醉后,先后使用生理盐水、4％多聚甲醛溶液进行心脏灌流,剪取胃、十二指肠、空肠及直肠各组织进行脱水、切片和苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色,于光学显微镜下观察各节段组织的形态学变化.结果 pCLE观察显示,对照组小鼠消化道黏膜组织表面荧光染色均匀,胃小凹、肠绒毛及肠隐窝形状完整,排列紧密,边缘结构清晰;而模型组小鼠消化道黏膜发生肿胀和变形,并伴有荧光染色不均匀和荧光素渗漏的现象.此外,部分组织出现缺损或细胞脱落,相邻特征结构(如胃小凹、肠隐窝)之间的边界模糊.HE染色观察显示,对照组小鼠消化道组织结构正常,细胞排列整齐、无缺损,黏膜下腺体大小一致且无增生性改变,无明显炎性细胞浸润;而模型组小鼠部分消化道组织结构缺损,细胞排列紊乱稀疏,黏膜下腺体萎缩,并伴有明显的炎性细胞浸润.pCLE观察结果与HE染色的组织学特征一致.结论 pCLE能够实现对消化道黏膜结构特征的快速、实时、大范围、高分辨率显微成像,并且能更真实、全面地展示其生理及微观结构特征,该技术在小动物消化系统损伤的组织学评估研究中显示出良好的应用前景和实际应用价值.